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北京莱博生物实验材料研究所

提供如下技术服务及培训

1. 单克隆抗体的制备、筛选、分离、纯化、分析和鉴定技术服务：

制备多克隆抗血清以及抗体纯化的服务。

2.基因的扩增、克隆：

根据用户的要求，设计相应的引物RT-RCR扩增基因克隆到载体上，并测序鉴定。

3.免疫印迹（western blot）与ELISA：
组织或细胞样品抽提蛋白，进行SDS-PAGE电泳，转膜，进行抗原抗体反应，结合显色法或化学发光法检测。样品通过双抗体夹心法进行抗体抗原反应，酶催化底物反应显色，用酶标仪检测OD值定量测定。

4.蛋白质的表达：

   蛋白质表达，利用已有的基因克隆与表达技术平台，可以高通量地实现cDNA库、多基因或片段的表达，筛选有市场前景的抗原、受体、细胞因子等重组多肽或蛋白质。
我们可提供以下服务：
  I .基于真核及原核多种系统的表达载体，可实现特定蛋白质的克隆与表达；
  II .基于phage display的高通量抗原表达与筛选。

5.蛋白质的分离、提取、纯化、分析技术服务：

I .基于多种类型的层析介质进行各种复杂蛋白质样品的提取和分离纯化。
II .各种重组蛋白的分离纯化及包涵体的折叠复性。

III .天然蛋白质的分离纯化与活性鉴定。

6.免疫组织化学染色技术与免疫荧光技术服务：

 由用户提供组织切片，我们对组织切片底物显色或荧光标记，通过显微镜观察拍摄，在细胞、亚细胞水平对相应抗原进行定性、定位、测定。

7.siRNA技术服务：

可根据用户提供的靶序列，设计相应的dsRNA,构建RNAi表达载体,可以进行长期封闭基因表达的研究。

8.永生细胞株的构建：

从用户提供血液样本中提取淋巴细胞，用EB病毒转化入B淋巴细胞建立永生细胞株，可永久保存遗传资源。

9.药物靶体鉴定技术：

            利用反义RNA或RNAi技术，针对选定的靶基因设计相应的antisense-RNA或dsRNA。利用逆转录病毒或腺病毒系统将其导入到靶细胞中，使选定的靶基因表达下调，从而可以研究细胞表型或功能的变化。这样的技术体系可用于药物靶体的鉴定，亦可应用于大规模基因功能的研究。

10. 各种基因运载系统用于基因转染，表达：

   I .脂质体基因转染方法。

   II .电击法。

   III .逆转录病毒转染方法。

   IV .腺病毒转染方法。

11.研究蛋白-蛋白之间相互作用：可用于寻找与目标蛋白有相互作用的蛋白质。

I .第3代酵母双杂交技术体系，可用来研究蛋白-蛋白之间的相互作用。

II .免疫共沉淀技术。

12.特异性表达系统：

   由于工作目的或基因本身的特性不同，可能需要在原核表达系统、酵母表达系统、动物细胞表达系统之间作出选择。我们可根据客户对目标基因的表达需求情况，协助确定适宜的表达系统方案，并在尽量短的时间内完成基因克隆和构建，并提供包含表达构件的菌种。

13.我们可提供的特异性表达系统包括：

A. 动物组成性通用表达系统：延伸因子启动子,可以在动物中普遍使用,只要基因所在的细胞有蛋白质的合成,这个基因就处于活跃转录状态

B.骨骼肌特异性表达系统：由肌细胞特异的启动子构成的表达框架。

C.乳腺特异性表达系统：用于制备乳腺反应器，分别由山羊酪蛋白启动子、绵羊乳球蛋白启动子和小鼠乳

腺瘤病毒启动子及相关调控元件构成的表达框架。

D.脑垂体特异性表达系统：由生长激素基因的启动子构成的表达框架。

E. 家蚕丝腺特异性表达系统：由丝素蛋白基因的启动子构成的表达框架。

F.鸡输卵管特异性表达系统：由卵白蛋白基因的启动子及相关调控元件构成的表达框架。

G.哺乳动物逆转录病毒系统；由MMLV基因的启动子构成的表达框架。

H.昆虫病毒系统：由昆虫杆状病毒构成。

I.广谱动物逆转录病毒系统（脊椎动物与无脊椎动物）：含有MMLV基因的启动子、广谱包装蛋白以及病毒启动子自灭活机制。病毒启动子自灭活机制保证在完成第一次感染后失去病毒复制能力，从而使得该系统成为一个转化效率高而又无扩散危险的系统。

J.双子叶植物表达系统：花椰菜花叶病毒启动子，双元载体。

K.单子叶植物表达系统：玉米泛素启动子，双元载体。

14. 即用型表达载体和基因

pIRES：带内核糖体进入位点，可用于双基因在真核的表达---3000元

(可以同时表达2个非融合型的基因,当一个产物需要另一个产物的加工时,尤其方便.)

pCre：重组酶真核表达载体---3000元(可以实现LoxP位点之间的同源重组)

pFLP：重组酶真核表达载体---3000元(可以实现FRT位点之间的同源重组)

pYFP-Nuc：细胞核定位表达增强型黄色荧光蛋白表达载体---3000元

(细胞质表达的标记信号容易与背景颜色混淆,从而产生误判,故核定位标记信号更方便实用.)

pBRP：诱导型细菌释放蛋白表达载体，可释放胞内产物到培养基---5000元

(大肠杆菌在细胞壁外还有夹膜,即使有信号肽,产物也不能进入培养基中, BRP可以在细胞壁和夹膜上打孔,从而释放产物)

phGH：人生长激素基因动物表达载体---6000元

pbGH：牛生长激素基因动物表达载体---6000元

ppGH：猪生长激素基因动物表达载体---6000元

phLF：人乳铁蛋白cDNA表达载体--------8000元

(采用genomic DNA,以人的延伸因子启动子控制,可以在动物的几乎所有组织表达.)

15.基因表达工程

可提供小试、中试及生产规模的发酵工程。有搅拌罐和气升罐，有大规模菌体分离设备和技术，通过微滤系统或连续离心为客户提供浓缩菌液或菌体。

16.大规模超纯质粒制备

一般实验室里所用试剂盒只能提取微克级到毫克级的工程质粒，而有些工作对工程质粒有大量的需要，如基因治疗、动物活体试验等。用试剂盒提取小量质粒比较简便，但如果用试剂盒提取公斤级的质粒，则操作难，造价大。我们具有从大规模菌体培养到质粒提取纯化的全套工艺系统，可满足客户的各种需求，超纯质粒无Genomic DNA污染，无蛋白污染，内毒素水平小于0.1EU/ug。(价格：每克质粒1万RMB)

17．承接课题，合作研究。

在充分交流、沟通的基础上可以共同合作研究。

          以上服务均由客户提供实验样本或提出具体实验要求（也可由客户提出要求，我们来设计实验方案），由我们按国际标准程序进行实验、分析、检测并提供优质实验结果，包括实验流程、实验数据、图片资料等等。